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二氧化碳培養箱的應用

發布時間:2022-06-14   點擊次數:994次

  二氧化碳培(pei)養箱就是(shi)一種在(zai)體外人工模擬適宜細胞在(zai)體生長環境的科學實驗設備,也是(shi)實驗室普遍使用的常規儀器(qi)之一。

     通常(chang)條件(jian)下(xia),需(xu)要二氧化碳(tan)培(pei)養箱能(neng)(neng)夠在(zai)以下(xia)幾個方(fang)面具有相當的控制(zhi)能(neng)(neng)力(li)及持(chi)續穩定(ding)性:

1、加熱(re)并使箱內(nei)溫度持續穩定。細(xi)(xi)(xi)胞(bao)對溫度的變(bian)化是非常敏(min)感的,大(da)多數動物細(xi)(xi)(xi)胞(bao)在超過(guo)40℃的環(huan)境下僅(jin)能(neng)存(cun)活數小(xiao)時。細(xi)(xi)(xi)胞(bao)培養(yang)溫度需(xu)要(yao)與其在體(ti)條件相一致,細(xi)(xi)(xi)胞(bao)種類不同,所需(xu)要(yao)的溫度范圍各異,比如絕大(da)多數哺乳(ru)動物細(xi)(xi)(xi)胞(bao)需(xu)要(yao)維持在37℃±1℃,魚類一般在28℃±1℃。

2、相對濕度大多(duo)數情況下需要維持在95%RH上下,以免培養(yang)基因濕度過低而(er)加(jia)速(su)蒸發,抑或(huo)因濕度過高影響細胞活性(xing)。

3、二氧(yang)化(hua)碳培養箱需(xu)要能夠控制(zhi)二氧(yang)化(hua)碳濃度,并(bing)長時間維持(chi)(chi)二氧(yang)化(hua)碳濃度持(chi)(chi)續穩定,通常情況下為5%,因為CO2不(bu)但(dan)是細胞(bao)所需(xu)成分,還是細胞(bao)代(dai)謝產物,并(bing)與培養基中的碳酸氫鈉形成緩(huan)沖(chong)體(ti)系(xi),輔助維持(chi)(chi)培養環(huan)境的pH及滲透壓相對穩定。

4、培養基(ji)的酸(suan)堿(jian)度需要恒定,絕(jue)大多數細胞耐受的pH值(zhi)范圍(wei)為7.2-7.4的弱堿(jian)性環境(jing)。除了必要的緩沖液外,還(huan)需要CO2作為補充。

      此外,污染防治(zhi)也是(shi)一個(ge)不(bu)可(ke)忽視的(de)(de)因(yin)素,高于140℃的(de)(de)干熱滅菌(jun)是(shi)常見的(de)(de)滅菌(jun)方(fang)式(shi),也是(shi)一種(zhong)成熟完(wan)備的(de)(de)滅菌(jun)方(fang)式(shi),是(shi)高溫導致(zhi)微生物脫水,或(huo)者直接(jie)阻(zu)斷遺(yi)傳,或(huo)者擾(rao)亂(luan)新陳(chen)代(dai)謝,讓其因(yin)缺乏恰當的(de)(de)刺(ci)激與(yu)營養環境而失去繁殖(zhi)能力(li)。其滅菌(jun)效果有保證,各國藥典(dian)及(ji)醫療器械監管機構也出(chu)臺了相關的(de)(de)技術(shu)指導方(fang)針,例(li)如歐盟(meng)藥典(dian)就要求如果在160℃下進行干熱滅菌(jun),滅菌(jun)時間不(bu)得短于兩小時。

      近幾年(nian),醫(yi)療行業(ye)加大了(le)基礎研發的(de)投入與力度(du),也拓展了(le)二氧化碳(tan)培養箱的(de)應(ying)用領域。
典型應用(yong):
1、干(gan)細(xi)胞(bao)培養與(yu)再(zai)生(sheng)醫學康(kang)復治(zhi)療(liao)的(de)基礎(chu)研究(jiu),干(gan)祖細(xi)胞(bao)的(de)分化多(duo)(duo)潛能屬性使得干(gan)細(xi)胞(bao)成為(wei)研究(jiu)熱點(dian),科學家(jia)渴望借助(zhu)干(gan)細(xi)胞(bao)找到眾多(duo)(duo)疾(ji)病(bing)的(de)治(zhi)療(liao)技術路(lu)線。以干(gan)細(xi)胞(bao)組織(zhi)工(gong)程為(wei)目標的(de)培養研究(jiu)需要二氧化碳為(wei)對環境敏感的(de)干(gan)細(xi)胞(bao)提供(gong)異(yi)常穩(wen)定的(de)體外(wai)培養環境,以期再(zai)現在體環境。
干細胞(bao)(bao)(bao)的(de)應用(yong)也有多種(zhong),比如皮膚干細胞(bao)(bao)(bao)在康復(fu)醫學、燒(shao)傷醫學及整(zheng)容(rong)美容(rong)上的(de)應用(yong),口(kou)腔(qiang)醫學、白血(xue)病、心血(xue)管疾(ji)病的(de)研(yan)究與治(zhi)療(liao)上需要(yao)數(shu)量可觀的(de)干細胞(bao)(bao)(bao),這些都需要(yao)生物反應器(qi)或者大規模培(pei)養(yang)來提供(gong)充足的(de)細胞(bao)(bao)(bao)儲備。細胞(bao)(bao)(bao)系的(de)培(pei)養(yang)也需要(yao)二氧化碳培(pei)養(yang)箱的(de)強力支撐。
2、藥物(wu)篩選(xuan)應用。現代藥物(wu)開發高(gao)通量篩選(xuan)需要二氧(yang)化碳(tan)培養(yang)箱助力(li)細胞(bao)培養(yang)。
3、疫(yi)苗研發。細胞的(de)大(da)規模培養與(yu)生物反應器放大(da)需(xu)要二氧化碳(tan)培養箱培養提供技術支持。
4、人(ren)工(gong)輔助生殖與體外培養需要二氧化碳培養箱提供穩定的環境(jing)保障。
5、細胞(bao)(bao)自(zi)(zi)噬(shi),近(jin)十年來(lai)逐漸成(cheng)為(wei)研究(jiu)熱點,諾貝(bei)爾生理(li)(li)學(xue)與(yu)醫(yi)學(xue)獎的(de)關(guan)注更是讓自(zi)(zi)噬(shi)成(cheng)為(wei)焦點。細胞(bao)(bao)自(zi)(zi)噬(shi)( Autophagy) 是以細胞(bao)(bao)質空(kong)泡化為(wei)特征的(de)溶(rong)酶體依賴性(xing)降解途徑。通過自(zi)(zi)噬(shi),細胞(bao)(bao)清除受損或衰老的(de)細胞(bao)(bao)器、降解半衰期長(chang)或過剩聚(ju)集蛋(dan)白,對細胞(bao)(bao)的(de)生長(chang)、分化、發育和維持細胞(bao)(bao)內環境(jing)的(de)穩態具有重要作用。研究(jiu)細胞(bao)(bao)自(zi)(zi)噬(shi)機理(li)(li),以及自(zi)(zi)噬(shi)基因變異(yi)與(yu)諸多(duo)疾病的(de)關(guan)系,有望讓科(ke)學(xue)為(wei)人類健康(kang)做出更直觀的(de)貢獻。
6、各種(zhong)非常態毒理(li)研(yan)究,比(bi)如(ru)低氧條件對(dui)細(xi)(xi)胞培養性狀的研(yan)究、高二氧化(hua)碳對(dui)器官組(zu)織細(xi)(xi)胞的刺激作用(yong)、環境對(dui)細(xi)(xi)胞組(zu)織的脅(xie)迫效應等。

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